گنجینه

چگونگی استخراج مولکول DNA  از سلولهای پیاز

وسایل مورد نیاز : پیاز – رنده – حمام آبگرم تا دمای 55درجه سانتیگراد – بشر – مایع ظرفشویی – نمک – الکل اتانول 95% – لوله ازمایش – لوله موئین – صافی –

ابتدا در درون یک بشر 250 میلی لیتری 10 میلی لیتر مایع ظرفشویی به رنگ روشن و 1.5 گرم نمک بدون یدریخته و حجم نهایی آن را به کمک آب به 100 میلی لیتر می رسانیم سپس آن را به آرامی حل کرده تا مایع ظرفشویی کف نکند . و یک پیاز بزرگ را رنده کرده و داخل یک ظرف 100 ml  می ریزیم و به دنبال آن بر روی آن از محلولی که نهیه کرده ایم اضافه می کنیم . ( مایع ظرفشویی غشا سلولی را می شکند و چربی ها و پروتئین های داخل سلول را حل می کند  و نمک موجب رسوب اسیدهای نوکلئیک می گردد ) .سپس بشر را  به مدت 10 الی 15دقیقه  داخل حمام آبگرم قرار داده  همزمان با پشت یک قاشق به آرامی پیازها را به دیواره بشر فشار داده و آن را له می کنیم اگر بشر بیش از 15 دقیقه در حمام قرار گیرد مولکولهای DNA  شروع به شکستن می کنند در حمام آبگرم تخریب غشا سلولی سریعتر شده و آنزیمهای DNA –ase  دناتوره می شود ( تا از کوچک شدن DNA به قطعات کوچکتر جلوگیری شود ) سپس بشر را داخل حمام آب سرد به مدت 5 دقیقه قرار می دهیم و در طی این مدت نیز با قاشق به آرامی پیازها را به دیواره فشار می دهیم این عمل به خارج شدن DNA  از هسته سلول کمک می نماید .به دنبال آن مخلوط حاصل را به کمک صافی صاف می کنیم باید سعی کنیم تا هنگام صاف کردن مخلوط کف نکند .در ادامه محلول حاصل را در لوله آزمایش ریخته و آن را به آرامی تکان می دهیم و به لوله مورد نظر الکل را  به آهستگی اضافه میکنیم به طوری که الکل و محلول با هم مخلوط نشوندو الکل در بالای عصاره پیاز قرار گیرد  . در این حالت  در پائین لوله عصاره شیری رنگ و در بالای آن الکل قرار می گیرد  که با یک پیپت الکل را به ته لوله برده و و در آنجا رها می سازیم و لوله را به مدت 2 الی 3 رقیقه به حالت سکون قرار می رهیم ( این مرحله بسیار اهمیت دارد ) تا  DNA  از عصاره خارج شده و وارد الکل گردد . رشته های سفید رنگی که در لوله ازمایش مشاهده می شود همان مولکول DNA است .

لازم به ذکراست که مولکول DNA همراه با پروتئینهای هیستونی به صورت کروماتینی قابل مشاهده است نه به تنهایی و به صورت خالص .

تهیه شده در گروه زیست شناسی استان همدان